生物素快速标记试剂盒
生物素快速标记试剂盒详细
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生物素3'末端DNA标记试剂盒(Biotin 3' End DNA Labeling Kit)能够利用终端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)将生物素标记的脱氧尿嘧啶三磷酸(dUTP)添加到DNA分子的3'末端。这种标记的优点是:不干扰杂交反应,不影响EMSA检测。该试剂盒标记的生物素化DNA探针适用于常见的核酸实验,包括Northern印迹、Southern印迹、EMSA凝胶迁移位移(也称为gel shift)、菌落杂交或原位杂交等。
终端脱氧核苷酸转移酶(TdT)能够在不依赖模板的情况下催化DNA分子3'末端与脱氧核苷三磷酸(dNTP)之间的连接反应。在TdT催化下,单链DNA分子3'末端与dNTP反应效率最高,其次依次是:3'端末端凸出的双链DNA分子,平端DNA分子。所以,我们尽可能让DNA处于单链的情况下进行标记,特别是对于EMSA实验,可先单链标记再进行退火步骤。
参照实验标准步骤标记,每次标记反应的DNA探针量约为5pmol。
1. 标记速度快,30分钟内完成标记;
2. 避免了使用同位素的危害和污染物的处理;
3. 标记产物稳定,可以长期存放一年;
4. 本试剂盒标记产物适合于多种分子生物学实验,干扰小。
本试剂盒低温运输,收到后请置于-20℃保存,保存时间24个月